1. Basado en la naturaleza de la fase estacionaria
a. Cromatografía de adsorción (líquido-sólido).
b. Cromatografía de reparto/adsorción (fases ligadas químicamente).
c. Cromatografía de intercambio iónico.
d. Cromatografía de exclusión molecular.
2. Basado en la Polaridad de la fase estacionaria
a. Cromatografía de fase normal
b. Cromatografía de fase reversa (inversa)
CROMATOGRAFÍA FASE NORMAL
Fue el primer tipo de sistema HPLC utilizado en el campo de la química, y se caracteriza por separar los compuestos sobre la base de su polaridad. Esta técnica utiliza una fase estacionaria polar y una fase móvil apolar, y se utiliza cuando el compuesto de interés es bastante polar.
CROMATOGRAFÍA FASE REVERSA
RP_HPLC, consiste en una fase estacionaria apolar y una fase móvil de polaridad moderada.
Una de las fases estacionarias más comunes de este tipo de cromatografía es la sílice tratada con R_Me2SiCl, donde la R es una cadena alquiltal como C18H37o C8H17.
HPLC EN AGUA
Normalmente se utiliza agua pura (de tipo II) para preparar blancos, estándares, eluyentes y para el pretratamiento.
El agua de mala calidad o contaminada afecta a la resolución al introducir picos fantasmas, alterar la selectividad de la fase estacionaria y afectar a las líneas de referencia durante la separación cromatográfica de muestras.
Ventajas
- Proceso automático, se requiere pocos minutos para obtener los resultados.
- Los resultados obtenidos son de una alta resolución y fáciles de leer.
Desventajas
- Es costoso.
- Su funcionamiento puede ser complejo y requiere un técnico para operar.
- El equipo tiene una baja sensibilidad.
Fuente:
https://www.geniolandia.com/13102139/desventajas-y-ventajas-de-un-hplc
